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一针见「耗子尾汁」:手把手教会你「小鼠尾静脉注射」操作技巧!

发布时间:2023-06-03 19:33:15  来源:分子生物医学微生物基因肌酐血常规检测肝功能肾功能检测分析诊断筛查临床医学实验动物模型实验外包委托大小鼠脑室海马脑立体定位注射慢病毒药物细胞实验创新药物临床前研究试验毒理代谢药理药代动力学药效实验安全性  浏览:   【】【】【

小鼠尾静脉注射,是动物实验中非常重要的一项实验技术,在小鼠静脉给药等实验中发挥着无可替代的作用。但是小鼠尾静脉十分纤细,不易观察,注射操作难度很高,「是个技术活儿」。

通过小鼠尾静脉的解剖结构来定位理想穿刺点


「知己知彼,百战不殆」。


成功的尾静脉注射离不开对小鼠尾部解剖结构的深入理解。有研究通过鼠尾横断面连续切片,报道了鼠尾的详细解剖结构[1],尽管研究使用的是大鼠而不是小鼠,但两者在尾部的解剖结构上十分相似,只是小鼠的尺寸更小。


从图1(左)中可以看到,鼠尾的血管主要由三条静脉(实心箭头)和一条中央动脉(空心箭头)组成,其余都是一些小的分支血管。中央动脉靠近腹侧,且位置较深,观察起来不容易,也不适用于穿刺。


背侧静脉和侧面的两条静脉位置较浅,都可以作为穿刺的候选。


其中,侧面的两条静脉相对背侧静脉更粗(尾部远端管腔内直径0.35 mm VS 0.18 mm),且走向更为清晰,通常作为穿刺的第一选择。简化的示意图1(右)可以帮助大家更好的理解小鼠尾部的解剖结构。


图1

不止是静脉的选择,鼠尾穿刺位置的选择也同样重要。穿刺位置的血管首先要足够粗,在此基础上,位置越浅,越容易穿刺成功,这点后续还会讲到。
从图1(左)中可以看到,近端的血管位置较深,远端的血管位置较浅,但血管的管腔内径并没有随着鼠尾的变细而成比例的变细。在鼠尾远端,血管仍保持较粗的管腔内径。这就为定位一个理想的穿刺点提供了可能。
因此,我们一般首选离鼠尾远端约1/3的位置的侧面静脉进行穿刺。

选择合适的注射器


小鼠尾静脉的结构,导致我们对注射器提出了更高的要求。
我们需要选择针头足够细又有一定长度的注射器。那么,到哪里去找到合适的注射器呢?注射器针头粗细规格表示方法为数字+Gauge(G)。数字越大,代表针头越细。
用于小鼠尾静脉的针头规格,最好在29G以上。目前,市面上容易买到的29G以上的注射器,主要是胰岛素注射器。其规格有29G,30G和32G。参数如表1。

但是32G的注射器针头长度太短,只有4 mm,并不方便操作,因此选择针头长度为8 mm和13 mm的30G和29G胰岛素注射器,是最为合适的。

注射前一个人可以用微型手电筒或LED小夜灯等紧贴尾静脉,在灯光的照射下,尾静脉会被很清晰的显示,此时,另一个人便进行注射操作。但该操作不易实现,需要多加练习,培养默契。


小鼠尾静脉注射的操作步骤:

1.首先要固定小鼠,最简单的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,让它的尾巴伸在盒盖的外面,用手抓住小鼠尾巴,轻轻往外拽,就可以固定好小鼠了。这种固定方法,小鼠可以在盒子里面活动,固定的也不是很牢固,但是只要你尾静脉注射的手法很熟练,就足以用来注射了。还有的固定方法就是用一个小的圆筒,最好是金属做的,(可以在当地的铁匠铺,或者买白铁铺里面定做)首先是金属比较结实,而且可以用来固定在铁架台上,方便操作。圆筒的一段有个盖子可以拿下来,盖子中间有个小孔,可以让小鼠的尾巴伸出来(中间的小孔可以用胶布缠一下,防止锐利的边缘割伤小鼠尾巴)。另外一段可以用金属网的结构,网的形状可以做成子弹头的头端形状。网状结构可以让光线透近来,方便小鼠钻进圆筒里面。圆筒的长度约10cm,直径约 3~4cm,可以做个系列长度和直径的圆筒,适合不同大小的小鼠。

2.固定好小鼠后就是注射了,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃 的1ml的注射器也可以用,针头用4号的就可以了。

3.注射前首先要让小鼠的血管充盈。可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法。若小鼠的血管很不清楚,推荐采用温水浸泡的方法,水温以不烫手为宜。温水浸泡2~3分钟后,取出小鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一会儿,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以进针了。若血管还不充盈,可以反复用温水浸泡,切不可冒险注射,除非你手法很熟练,另当别论。

4.小鼠尾部共有四条血管,一般认为左右的两条静脉比较容易注射,多采用这两条静脉进针。一般要求进针部位靠近小鼠的尾端,这样若注射失败的话,还可以再向上选择进针点。但是进针部位也不可以太靠下,因为越往下,静脉越细,操作越难,一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比较好。

5.最关键的就是进针了。进针时操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴,让小鼠的尾巴在经过拇指后向下弯曲,进针点靠近拇指指甲。针头和血管呈约30°角,针尖斜面朝上,轻轻挑刺入皮肤后针头立即和血管平行,一般情况下一次就可以进入血管,可以将针头刺入血管一大半,左右轻轻晃动针头,确定针头在血管内,就可以推注药液了,正常情况下,推注的过程应该没有明显阻力,血管也不会鼓起。推液时动作宜轻柔,若发现血管鼓起,那是针头没有刺入血管,需立即拔出针头。

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