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目录

一、 引言2

二、 C57BL/6J老龄鼠背景知识3

(一) C57BL/6J老龄鼠老年小鼠品系3

(二) 小鼠与人类生命阶段的对应关系3

(三) C57BL/6J老龄鼠老年鼠的常见特征、表型与相关资源4

三、设计老龄鼠实验的注意事项10

四、老龄鼠在疾病研究中的应用11

五、老龄鼠饲养注意事项13

六、老龄鼠市场信息及购买渠道13

(一)老龄鼠为什么这么贵?13

(二)公司优势14

  1. 引言
    随着老龄化社会的到来,老龄医学研究已经成为了一个非常棘手、非常重要的课题。根据最新的人口普查数据显示,现在全国65岁及以上人口已达到了总人口13. 5%,这个数字相当于是1. 9亿人,2035年预计数值将达25%,可以说是一个深度老龄化社会。
    与老龄化社会一起到来的,必然是衰老相关的疾病的发生,例如阿尔兹海默症、老年抑郁症、骨关节炎或者是肿瘤等等。这些伴随衰老过程中产生的疾病背后,揭示着衰老是由一系列分子和细胞层面的变化积累造成的,比如人类基因组失去了稳定性,端粒消减线粒体功能发生了缺陷,这些都会导致单个细胞的衰老和死亡。同时干细胞的耗尽,细胞间的交流发生改变,导致新生的细胞产生受到了一些阻碍。
    这些发生在分子和细胞层面上的改变,在人体基层层面展现出来是具有一个时间依赖性和渐进性的,最终就会发展表现为老年人中存在的一些正常的生理功能的丧失,或者是与一些致病因素发生相互作用,从而导致了一些比较异常的损伤,以及造成了与衰老相关的疾病的产生。但是针对人类衰老研究,最现实的一个问题是它的周期非常的漫长,也需要多种资源配合,以及非常详细的提前规划。
    由于小鼠和人类在遗传机理和生理表征上都有非常高的相似性,所以小鼠模型已被广泛应用于人类衰老的医学研究。目前老龄小鼠模型已经是被用于了诸多研究课题中,根据NIH归纳项目报告,目前老龄小鼠模型已经适用于如健康生命周期研究、骨质疏松、肌肉萎缩、心脑血管疾病、与年龄相关的免疫功能变化、视力听力障碍等等关于老龄化疾病的各个方面。在这些研究中,我们最常会使用到的小鼠,其中一个就是C57BL/6J 小鼠,它是使用最广泛的近郊小鼠品系,也是第一个被全基因组测序的小鼠品系。截止目前,现有大概36000 个已发表的研究是以它作为一个研究对象。这也使品系成为了一个特征表型分析最为全面的一个小鼠品系。在使用它进行研究的过程中,也有非常多的既往研究和数据可用参考。
  2. C57BL/6J老龄鼠背景知识
  3. C57BL/6J老年小鼠品系
    C57BL/6J,简称B6,1921年 Little(立特)由Abby Lathrop(艾比·拉特洛坡小鼠株)得到动物后开始近亲交配育成数个近交系。1937 年分开C57BL/6 及C57BL/10 两系。C57BL/6J 保种于 JAX 。1986 年日本实验室引进到中科院上海实验动物中心,2001 年再次从美国再次引种。B6是黑色近交系小鼠,乳腺肿瘤自然发生率低,化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤。对放射物质耐受力中等,补体活性高,较易诱发免疫耐受性;对结核杆菌敏感;对鼠痘病毒有一定抵抗力。干扰素产量较高,对百日咳组织胺易感因子敏感,嗜酒精性高;肾上腺素类脂质浓度低。常被认作“标准”的近交系,为许多基因编辑小鼠提供遗传背景。
  4. 小鼠与人类生命阶段的对应关系

很多研究者在需要使用老龄鼠进行研究时,会对老龄鼠的具体月龄产生困惑。下图给出了小鼠月龄和人类年龄的对应关系,它们分为三个阶段:成年鼠、中年鼠、老龄鼠。

小鼠月龄 对应人类生长速度
小鼠出生-1月龄 150倍
小鼠1-6月龄 45倍
小鼠6月龄 25倍

因为我们使用小鼠去进行人类疾病研究,必须要了解小鼠的不同年龄阶段是怎么去对应到人类的一个生命周期的。和人一样,小鼠也经历着与年龄相关的变化过程和疾病的发展过程,所以了解这样的一些过程是对我们实验设计至关重要的。首先,要明确一点是小鼠的成熟速率和人类是没有一个线性相关性的,所以在小鼠出生至第一个月的时候,它乘除速率大概是可达到人类的150倍,而之后在1到6个月,速度会下降至45倍速。在之后6个月以上的时,速度将会继续下降至人类的25倍速。
1、成年小鼠(3-6月龄):发育完成但尚未受到衰老的影响
3–6 月龄成年鼠(middle-aged):无论是研究发育、成熟、还是衰老,都以成年作为对照参考。虽然小鼠的性成熟在 35 天(5 周)左右,但小鼠体内许多生物学过程和结构的快速成熟生长仍持续到三月龄(体成熟或者叫完全成熟)。所以成年(adult)的小鼠最少是 12 周(3 月龄),上限通常为 6 个月,相当于人类的 20-30 岁。超过 6 个月,小鼠会出现一些与年龄有关的变化(比如雌性老龄小鼠在 7-8 个月时产仔数减少,不再作为繁殖种群)。
2、中年小鼠(10-14月龄):可以检测到一些(并非所有)衰老生物标志物的衰老变化
10–14月龄中年鼠的衰老程度可以根据小鼠体内与衰老相关的生物标志物的监测来判断,中年小鼠是指部分衰老相关的标志物出现衰老变化。如果进行衰老相关的研究,通常会在设计时设置一组中年小鼠对照组,来确定相关变化是否仅在老年期出现。中年小鼠的年龄应至少 10个月大,上限通常为14-15个月,相当于人类的 38-47岁。在这个时间段里,大多数生物标志物已经开始出现变化。
3、老年小鼠(18-24月龄):所有动物的几乎所有生物标志物都可以检测到衰老变化
18–24 月龄老年鼠是指在小鼠体内几乎所有生物标记物都可以检测到衰老变化。老龄小鼠应至少 18 个月大。对于C57BL/6 小鼠和许多近交系小鼠,上限为24 个月,相当于人类的56-69 岁。但老龄鼠的年龄上限取决于具体品系,小鼠品系不同可能老龄鼠的上限会更高。并且,小鼠品系的特定疾病也会影响生物标志的检测结果,应以最终的尸检和组织病理学评估为准。

  1. C57BL/6J老龄鼠的常见特征、表型与相关资源
  2. C57BL/6J老龄鼠的正常表型
    伴随着年龄的增长,小鼠的外观是会发生一些改变的,接下来给大家展示一些常见的衰老过程中的一些表型。在这里列出三个B6/J老龄鼠的照片,供大家参考。


(1)区域性脱毛
脱毛可能是由于小鼠自身有一个过度的梳理行为,或者是同伴间有一个互相礼毛的行为,造成了一个脱毛。这样的行为和它的性别、年龄都是有相关性的,其实是属于小鼠的一种正常的社交行为,所以可以看到左边的这两张图,小鼠是出现了一个眼周局部的脱毛,以及因为被同伴理毛而导致嘴鼻处有胡须的脱落。另外还比较常见的就是老年鼠背毛会变薄,呈现出灰色或者是棕色。这些外观在 B6G 老龄属里面是属于一个正常的老年特征,它与疾病的发生是没有关系的。
(2)体重
随着年龄的增长小鼠首先它的体重会随着年龄的增长而不断的增长,同时我们可以看到它数值也是变得不稳定,个体之间的差异也在变大。C57bl/6J老年小鼠10月龄后体重会增加到32 克以上(小鼠来源、饲料也有可能造成小鼠体重增加),15月龄以后常规体重都会达到33克以上,18月龄老年雄鼠体重常规在32克-38克之间。老年雄鼠后期尽量不要合笼(老年鼠后期合笼一周内每天喷洒酒精,以小鼠体表湿透为原则),随机合笼可能会出现打架发炎等情况。雌鼠正常在八个月以后退役鼠合笼,正常雌鼠在体重在 23 克以上 ,雌鼠年龄超过 18 月-21 月龄以后体重常规都在29克以上,22月龄雌鼠体重一般都会超过 30克,最重可以达到40克左右,雌性老龄鼠年龄一般超过15月龄容易出现打架、舔毛、脱肛、白内障、自发肿瘤等。


(3)体脂、葡萄糖代谢率
另外身体组份的发生,比如它的体脂比会发生改变,从25- 7周这样一个范围。整体上,小鼠的身体脂肪含量是随着年龄的增长有一个明显的增长。而且这里面看到雌鼠和雄鼠,它的变化趋势也是略有不同的。雌鼠26- 52周是有一个快速增长,而雄鼠是前期有一个小幅的下降,随后是有一个快速的脂肪增长。还比如葡萄糖的代谢也会随着年龄的变化而发生一些变化。如果我们的研究中是会涉及到比如身体组份或者是葡萄糖的代谢,我们就会非常关注这些随着年龄因素而引发的变化,因为它有可能会影响我们实验的一个设计。


  1. C57BL/6J老龄小鼠行为学特性
    成年(2-6个月大)和老龄(18个月以上)动物之间存在许多与年龄相关的行为差异。在过去的二十年中,基因靶向技术的进步使我们能够在小鼠体内产生靶向的基因突变,这使研究人员增加了使用基因突变小鼠模型来研究大脑衰老与行为之间的关系的兴趣。尽管大量的研究将成年和老龄动物进行了比较,并且对突变模型的研究日益增加,但有关C57BL/6J背景鼠从成年到中年(约2-12个月大)的年龄相关行为变化的信息仍然相对较少。
    (1)体重增加,神经肌肉力量和疼痛敏感性减弱,运动功能障碍


(2)自主活动减少,焦虑行为改变


(3)社交活动减少



(4)老龄C57BL/6J小鼠的声惊吓反应降低和预脉冲抑制增加



(5)老龄C57BL/6J小鼠的强迫游泳刺激反馈降低


(6)空间学习和记忆力受损
(7)老龄C57BL/6J小鼠性恐惧记忆减少


C57BL/6J老龄鼠的临床表现

伴随衰老产生的除了一些我们所说的正常的表型,也会发生一些和疾病相关的表型。


直肠脱出
小鼠由于直肠比较短,在衰老的过程中,因盆腔肌肉组织的萎缩,会导致直肠相对来说更容易脱出。目前针对于直肠脱出没有非常有效的治疗方法。轻症的时候可能它并不影响存活,但是情况严重的时候就有可能考虑要进行安乐死。

  1. 眼部病变
    相对来说,小鼠它的角膜面积更大,所以也更容易接触到一些异物,导致发炎。另外伴随着衰老的过程,泪腺萎缩,还有一些慢性炎症都会导致泪液的减少,角膜的过度损伤,最终就会呈现出眼球浑浊等病变的表型。
  2. 脱毛和皮炎
    和理毛或者社会社交行为导致的非疾病性脱毛还是有一些区别,这个理毛更多的时候是因为打斗或者是感染而引起的溃烂性皮炎,进而导致的脱毛。这时候根据实际情况,我们可能要进行一个分笼饲养,对小鼠修剪指甲或者是进行一些给药的处理,甚至在情况严重的时候可能需要考虑到是不是要进行安乐死。
  3. 可触及的肿块

这种皮下或者是体内可触及的肿块,可能是伴随着是衰老过程中有肿瘤的,或者是一个囊肿的。产生过大的肿块最直接的影响就是会影响到小鼠的活动能力,进而也可能会对它的健康状况产生一些影响。

老龄小鼠良性退行性和炎性病变举例


三、设计老龄鼠实验的注意事项

1、您需要多少只小鼠?因为根据小鼠的存活数据曲线,雌性和雄性的小鼠存活率还是有一定差异的,随着时间的延长,损耗率是在不断上升。

2、 实验从何开始?因为有一些表型和指标可能在小鼠的中年期并没有显现。这个时候我们既不希望错过一个数据的最佳采集时间,同时也不想因为过早的进行实验而造成人力物力的浪费。

3、小鼠健康状况如何?这个是直接涉及到实验数据是否可信,以及它的可重复性。容许的情况通常包括:皮毛颜色变化、理毛、脱毛、挑拣胡须;不能容许的通常包括:伤口、皮炎、咬合不正、疝气/肿块、其他不良的临床情况。

4、如何辨别单只小鼠?常用的小鼠标记方法包括:耳孔、耳标、微芯片、纹身。

5、雌性和雄性间是否有差别?了解老龄鼠的性二态性,6个月龄的C57BL/6J小鼠表现出葡萄糖耐受异常,且随着年龄增长而加剧与雌性小鼠相比,雄性小鼠的葡萄糖不耐受性更严重。实验中应充分考虑性别差异,并按性别分析数据。

6、研究数据如何测定?

7、实验终点如何设定?因为对于老龄鼠研究来,我们需要从保证实验可靠性和动物福利的两个角度共同去考虑。

四、老龄鼠在疾病研究中的应用

C57bl/6j 老年小鼠的研究应用包括免疫学、癌症、寿命干预措施和生物标志物研究。C57BL/6J 是应用最广泛的近交系,也是第一个进行基因组测序的菌株。C57BL/6J 小鼠对听力源性癫痫发作具有抗性,骨密度相对较低,并发展为与年龄相关的听力损失,它们还容易患上饮食引起的肥胖、二型糖尿病和动脉粥样硬化,还经常被用于与神经退行性疾病和骨密度相关的研究。总的来说, C57BL/6J 小鼠繁殖良好,长寿,对肿瘤的敏感性较低。与BALB/c和DBA/2J相比,C57BL/6J小鼠的原始造血干细胞则表现出明显的衰老延迟性。

  • 覆盖寿命(lifespan)和健康期(health-span)的基础生物学研究;
  • 免疫学、肿瘤学研究;
  • 饮食、运动、心血管、内分泌和代谢等疾病研究;
  • 学习、记忆、认知、睡眠和神经退行性疾病研究;
  • 年龄相关的视力、听力障碍研究;
  • 骨骼、肌肉、身体组成相关研究

1、利用饮食研究应用对寿命的影响

具有相同卡路里数但营养成分不同的饮食可以改变寿命中位数;营养成分也会影响老年动物的骨骼肌力量品系。


认知增强剂治疗可改善老龄鼠的认知能力


老龄鼠识别物体转移分离的能力下降;用D-丝氨酸治疗可以逆转与衰老相关的认知能力下降。


3、免疫衰老

五、老龄鼠饲养注意事项

1、分笼时,尽量不要将不同笼盒的小鼠装在一盒里;

小贴士:笼子里的实验鼠从离乳后就一直住在一起,如果和不熟悉的笼子伙伴住在一起,自然会互相争斗

2、更换垫料时,留取一点原来的垫料放在新换垫料的表面,以保留原有的气味。尽量使用原来的笼盒;

小贴士:如果不使用原有笼盒,一定要将换下来的笼盒刷洗干净,并彻底消毒灭菌,以减少残存的味道对其他实验鼠的刺激。

3、降低饲养密度:建议每笼饲养2-3只;动物打架严重时,采取单笼单只饲养;

4、将饲养笼盒放在安静的环境中,笼子和墙壁之间保持一定距离,以减少多余的噪音、振动和其他干扰;

5、每天观察实验鼠,如果发现笼中有打斗现象,请将最强者(身体无伤、胡须完整)挑出单笼饲养;同时对受伤的个体,每日用75%的酒精或碘酒消毒,一般5-7天可以痊愈;

6、在垫料中增加筑巢材料(例如纸屑、纸板隧道和棚屋),可以减少理毛和打斗行为;

7、有证据表明将拧干的碘伏棉球置于小鼠笼内,可减少打斗现象的发生;

8、建议适应性饲养一周以后再开展实验。

六、老龄鼠市场信息及购买渠道

(一)老龄鼠为什么这么贵?

目前很多公司都是大批量的量产,量产主要针对常规动物品系,市场普遍需求量大。相对应的因空间的利用率而减少老鼠的月龄,因为目前相同空间对于量产的公司来讲所产生的效益完全不一样。所以目前只要是大的生产商都不会特意的去做这个板块。从而也就衍生了一小公司专业生产老龄鼠,物以稀为贵,所以也就会导致价格也就上涨。

简易而言,养殖时间长、单位效益低、市场量小,造成了老龄鼠价格高。

(二)公司优势

专业从事和经营老年鼠/老龄鼠销售业务的单位,可以提供7-24全月龄段动物,主打未繁育自然衰老精英老年鼠

· 可提供现货,高效率配合客户的课题研究;

· 饲养人员经验丰富,可有效预防小鼠打斗,并保证动物状态健康;

· 控制饲养密度;

· 饲养以及运输时不混装不同笼盒小鼠;

· 换笼时留下原有气味,安抚小鼠,不更换同伴。定期进行健康监测季度环境检测。小鼠发货附合格证,严格按客户实际要求月龄发货,环境条件一致,均一性好。



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