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【质谱检测组织成像采集高通量药物筛选实验委托服务】

发布时间:2023-04-15 18:36:40  来源:质谱检测组织成像采集高通量药物筛选实验委托服务  浏览:   【】【】【

质朴组织成像高通量药物筛选

高端适用性广的MALDI TOF/TOF系统工作速度比传统系统要快20倍,高达50像素点/秒的最快采集速度可以满足非标记超高通量药物筛选(uHTS)以及高分辨率质谱组织成像的需求。非标记质谱检测能有效加快和简化药物筛选和测试方法的开发,并能避免人为因素的影响。检测不需要使用SPE和HPLC柱,比LC/SPE-MS方法能减少大量溶剂的消耗,一般100nL样品量就足够分析使用。搭配全新设计软件系统,能在8分钟内完成1536个样本的检测,系统同时兼容96,384,3072和6144的点样形式。

质朴检测组织成像采集高通量药物筛选原理:将MALDI质谱离子扫描技术与专业图像处理软件结合,直接分析生物组织切片样本,产生样本中所有化合物质荷比(m/z)的二维离子密度图,并对组织中化合物的组成、相对丰度及分布情况进行高通量、全面、快速的分析。这项技术不局限于特异的一种或者几种分子,它可在组织切片中原位检测蛋白质、脂类、药物分子等不同的物质,并提供这些物质在组织中空间分布的精确信息,同时可进行相对定量。该方法可以高效精准地获得药物分子或生物标志物的空间分布,因此在药物代谢研究和生物标志物发现中具有广泛的应用。


质谱检测组织成像采集高通量药物筛选技术的应用

1. 蛋白质纯度分析以及分子量测定

MALDI-TOF是一种软电离技术,可用于检测目标蛋白或多肽是否存在,有无二聚体存在,以及进行纯度情况的大体评估。MALDI-TOF鉴定分子量范围也非常广,能够鉴定700-1000000Da的蛋白分子量,准确度高达0.1%~0.01%,远远高于目前常规应用的SDS电泳与高效凝胶色谱技术。

2. 蛋白指纹谱鉴定(PMF)

肽质量指纹谱(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)是蛋白质被识别特异酶切位点的蛋白酶水解后得到的肽片段的质量图谱。由于每种蛋白的氨基酸序列(一级结构)都不同,当蛋白被水解后,产生的肽片段序列也各不相同,因此其肽质量指纹图也具有特征性。将肽谱图与数据库中蛋白质理论肽谱图对比,从而鉴定蛋白质。因此,分子质量的精确度是PMF的关键指标所在,但蛋白质的翻译后修饰可能使PMF的质量数与理论值不符,从而对蛋白鉴定的准确度有一定影响。

3. MS/MS串联质谱法测序

串联质谱法(MS/MS),是目前常用的质谱鉴定方式。MS/MS先通过一级质谱测定肽段质量,再选取丰度高的肽段进行二级质谱分析,在二级质谱中肽段相互碰撞导致氨基酸键断裂,产生肽段碎片离子经由检测器分析,从而得到筛选肽段的氨基酸序列信息。MS/MS利用丰富肽段碎片的精确质量信息,更具有特异性、可信度,极大地增加了数据库检索的可靠性。

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