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【提供北京专业优质基因克隆技术实验外包服务】

发布时间:2021-08-06 20:18:19  来源:分子生物微生物检测检验鉴定分析诊断实验外包代做技术服务公司医学科研动物病理实验大小鼠Morris水迷宫实验两侧海马脑室脑立体定位注射实验外包ad转基因阿尔茨海默症小鼠app/ps1双转基因小鼠db/d  浏览:   【】【】【

基因克隆作为最基本的分子生物学手段广泛应用于目的蛋白的表达、构建表达载体等实验。晨晔生物提供成熟、高效的基因克隆服务。主要服务内容如下:
基因钓取:为客户从相应文库中钓取所需的基因。
基因克隆:为客户将目的基因克隆到T载体上。 按照客户要求,进行特定的基因克隆服务
服务说明
1. 客户提供样品组织、细胞或其DNA/总RNA。
1) 实验材料必须保证新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻。
2) 基因组DNA/总RNA无明显降解,总量大于5 mg。请您提供尽量多的材料。
提供结果
实验报告(包括具体实验步骤、照片等)、测序彩色波形图、测序方向图、序列碱基图、酶切位点图、保存电子版结果、含有目的基因的质粒及穿刺菌保(或PCR产物)、引物等。

TA克隆技术(TA cloning)利用Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理,不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。TA克隆是目前克隆PCR产物简便、快捷的方法。拥有成熟的技术和完善的服务流程,能完成任何复杂、即用的TA克隆服务。我们可以根据客户需要,将客户提供的PCR产物连接到pMD18-T载体中,进行转化,筛选,测序等一系列实验,帮您从根本上提高科研工作效率。

服务流程:
1. 检测样品DNA长度和浓度。
2. 加“A”尾巴(若PCR产物已有“A”尾巴则无需此步骤)
3. PCR产物与载体连接
4. 转化并筛选重组子
5. 重组子测序
6. 测序结果分析
7. 重组质粒纯化

拥有人、小鼠、大鼠等多个物种约10万个cDNA克隆,是当前数量完备的基因库。为了方便科研人员的搜索与查询,我们尽可能对这些cDNA克隆进行描述,包括NCBI序列号、别名、CDS区、氨基酸序列及克隆载体等,旨在为客户提供优质、快捷的服务!每一个ORF克隆的插入片段都进行了全长测序,能够保证氨基酸序列与GenBank中相应克隆的参考氨基酸序列一致。

cDNA克隆的一般实验过程:

1、提取总RNA,并分离mRNA
2、逆转录PCR,合成cDNA双链
3、制备载体,并连接cDNA双链和载体
4、质粒转化
5、快速鉴定、菌落PCR
6、cDNA 文库的扩增和建立

DNA分子中由于发生碱基对的增添、缺失或改变进而引起基因结构的改变,称为基因突变。定点突变 (mutagenesis)是通过PCR等方法向目的DNA中引入突变,包括碱基的添加、删除、点突变等。该技术能迅速、高效地改变DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是研究蛋白质结构和功能之间复杂关系的有力工具,也是研究人员在实验室中改造、优化基因常用的一种非常有用的手段。目前,由PCR介导的定点突变相比于其他突变技术具有周期短、成功率高、不受酶切位点限制等优点,是使用最普遍的定点突变方法。

实验流程:
1:设计突变引物
2:PCR扩增进行突变实验:
3:突变产物克隆到您所需要的载体上
4: 测序验证突变成功
5:提交详细的实验数据、实验报告及突变后的质粒和保存菌
提交的产品和资料:
1. 实验操作过程,突变用引物序列;
2. 冻干后的测序质粒及含有改质粒的穿刺菌保;
3. 详细实验报告,包括突变基因测序报告。

责任编辑:北京专业优质基因克隆技术实验外包服务
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